ripa裂解液说明书（ripa裂解液的作用）
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WB实验时,细胞裂解液如何配置?
细胞裂解液（Tris－HCL）1．1MTris溶液的配置 取Tris242g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。
裂解液pH值很重要，最好一次不要配多，时间长效果不好，我一般一次配100mL，避光保存。离心速度：800-1000rpm，5min 研磨轻柔很重要 培养淋巴细胞的最佳培养液是RPMI 1640，因为是原代细胞，要用10%胎牛血清。
孔板加100－200ul确实偏多，我为了减少上样体积、增加上样量，一般是先将细胞消化下来，然后一个50ml的培养瓶细胞沉淀加100－200ul的细胞裂解液，这样提出的蛋白一般是5-10ug/ul。
什么是蛋白裂解液
1、RIPA主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA裂解液（RIPA Lysis Buffer）是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
2、本品是一种传统的细胞组织快速裂解液。使用本品裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 Western、IP 等。主要成分为50mM Tris （pH4），150mM NaCl，1% NP-40， 0.1% SDS。
3、RIPA主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA裂解液（RIPA Lysis Buffer）是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。
4、变性。储存蛋白裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞和组织的裂解液。能裂解细胞并充分释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、 *** 白。储存蛋白裂解液最好变性。先变性后保存的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液。
Acr/Bic作用
聚合时，丙烯酰胺（Acr）分子通过加成反应形成长链，甲叉双丙烯酰胺（Bic）的作用是在长链之间形成交联，成为具有三维网状结构的凝胶。
聚合时，丙烯酰胺（Acr）分子通过加成反应形成长链，甲叉双丙烯酰胺（Bic）的作用是在长链之间形成交联，成为具有三维网状结构的凝胶。所以在凝胶电泳中除了具有电泳的分离外还具有分子筛作用，从而增高了它的分辨能力。
ACR加工助剂：ACR为甲基丙烯酸甲酯和丙烯酸酯、苯乙烯等单体的共聚物。它既可用作加工助剂，也可用作改性剂。ACR加工助剂的重要作用是促进pcv塑化，缩短其塑化时间，提高熔体塑化的均匀性以及降低塑化温度。
BIC（Bayesian InformationCriterion）贝叶斯信息准则与AIC相似，用于 模型选择 ，1978年由Schwarz提出。
尿检项目中的“ACR”是尿蛋白和尿肌酐的比值。尿蛋白与肌酐比值测定是用于监测尿蛋白排出情况的一种新的可靠 *** ，血液中常会有定量的对人类生命活动不可或缺的蛋白存在。
裂解液配制 ***
1、1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用）配制步骤：将以上a、b、c试剂溶于900ml去离子水中；调节溶液pH值到2-4，加去离子水定容到1000ml；在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。
2、配方：NH4CL29gKHCO300gNa2EDTA32mg溶于1000mL蒸馏水，pH2-4，效果一直很好。注意：（1）裂解液如果放在冰箱里，一定要预热，37度即可。
3、western blot实验操作步骤如下： 准备样品 1）制冰，准备冰盒。2）配制细胞裂解液：根据细胞数量确定所需裂解液：50ul/六孔板一孔 。
4、bead-beating 也是常用的机械处理方式，有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高，但通常得到的DNA片段较小。
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